牛呼吸道综合征（BRDC）是一种严重影响我国和世界各地圈养牛的疾病。牛病毒性腹泻病毒（BVDV）和牛副流感病毒3型（BPIV3）是引发BRDC的主要病原，也是影响养牛业的主要毒株。为根除上述病毒/疾病，需要快速鉴定病毒，并进行治疗。因此，本研究采用逆转录重组酶聚合酶扩增（RT-RPA）和横向试纸（LFD）法，分别基于BVDV 5′-UTR基因和BPIV3磷酸化蛋白P基因，设计了引物和横向（LF）探针，建立了1种可快速、简便鉴定BVDV和BPIV3的方法。在35 °C试验环境中，使用RT-RPA在25 min内成功扩增BVDV和BPIV3 RNA，横向试纸在室温（RT）中5 min内可观察检测结果。BVDV的最低检出限为50拷贝RNA，BPIV3的最低检出限为34拷贝RNA。研究证明，本试验建立的双向RT-RPA LFD方法精确、定向，可作为BVDV和BPIV3现场分子学诊断工具。该方法可检测瘟病毒A、B属和BPIV3，且与猪瘟病毒（CSFV）和牛传染性鼻气管炎病毒（IBRV）等无交叉反应。临床样品检测进一步对该方法的检测性能进行评估，发现其与实时RT-PCR（RT-qPCR）相比，表现出良好的性能。此外，RT-RPA LFD方法更快速，且操作简便，无须过多培训。

原文链接：https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/34728269/